Génération d'atmosphère (gazeuse et/ou particulaire) pour des expositions in vivo et in vitro. Evaluation de la cytotoxicité . Toxicologie respiratoire .

1. Génération d'atmosphère (gazeuse et/ou particulaire) pour des expositions in vivo et in vitro.

• Monogazeuses : ex.ozone (4 générateurs), aldéhydes, ammoniac, HF (Fluorure d'hydrogènes), ...
• Aérosols solides (poussières) et liquides
• Fibres
• Reconstitution d'atmosphères : ex. fumée d'incendie
• Prélèvement d'atmosphères ex. sortie d'incinérateur

2. Evaluation de la cytotoxicité.

MTT (Methyl Thiazolyl Tetrazolium), Rouge neutre, ATP (Adenosine Triphosphate), 3H-thymidine, LDH (Lactate Deshydrogénase)

3. Toxicologie respiratoire.

In vivo

• Plethysmographe corps entier (analyseur BUXCO)
• Toxicité par inhalation, par instillation intratrachéale, par gavage
• Bilan biochimique (automate Cobas Fara)
• Bilan hématologique (automate Technicon HI)
• Histologie, marquages immunohistochimiques (sucres menmbranaires)
• Lavages broncho-alvéolaires : dosages de médiateurs de l'inflammation (cytokines, eïcosanoides...), métalloprotéinases...

In vitro

• Culture primaires de cellules de trachée de cobaye et de rat, macrophages alvéolaires
• Dosages enzymatiques : SOD (superoxyde dismutase), GPx (Glutathion Peroxydase)
• Detection des protéines de stress thermique (HSPs) par Western Blot
• Immunocytochimie : marqueur du cytosquelette (cytokératine, vimentine), marqueurs menbranaires (sucres, molecules d'adhesion)
• Dosage de médiateurs cellulaires : cytokines, seconds messagers, molecules d'adhésion solubles

  Immunotoxicologie (ex vivo et in vitro)

• Phagocytose des levures
• Prolifération lymphocytaire
• en développement : activité NK, dosage d'histamine et d'Ig.